色譜是一種分離分析手段，分離是核心，因此可以說擔(dān)負(fù)分離作用的色譜柱是色譜系統(tǒng)的心臟。能否找到合適的色譜柱，關(guān)系到整個分析工作的成敗。目前市場上反相色譜柱有C18、C4、C8、C30、氰基柱、硅膠柱、氨基柱、苯基柱等。濟(jì)南色譜級N,N二甲基乙酰胺彪仕奇為收集總結(jié)了一些注意事項，希望對大家有所幫助。
C18色譜柱的選擇主要要考慮兩點(diǎn)，柱子規(guī)格和柱填料對色譜柱的影響。
C18柱選用的原則：
1、在pH值正常范圍內(nèi)（2~8）可選用現(xiàn)代高純硅膠色譜柱，具有峰形好，重現(xiàn)性高和壽命長的特點(diǎn)，選用較短的柱子可以提高分離效率，選用較長的柱子可以增加保留，選用小顆粒度的填料可以提高分離度，對分子量大的組分宜選用大孔徑填料的色譜柱。
2、分離極性大的組分（流動相水相過大）采用AQ類似的色譜柱。
3、選用經(jīng)過烷基化處理封口的填料可防止堿性化合物的拖尾現(xiàn)象。
3、選用含碳量高的柱子，增加保留值。
4、選用較短的柱子(如15cm，7.5cm)。
5、選用小顆粒度的填料。
6、對分子量大的組分選用大孔徑填料的柱子。
色譜柱使用過程中壓力升高的原因
如果壓力升高，一種可能是燒結(jié)濾片被堵塞，這時應(yīng)更換濾片或?qū)⑵淙〕鲞M(jìn)行清洗；另一種可能是大分子進(jìn)入柱內(nèi)，使柱頭被污染；如果柱效降低或色譜峰變形，則可能柱頭出現(xiàn)塌陷，死體積增大。在后兩種情況發(fā)生時，小心擰開柱接頭，用潔凈小鋼將柱頭填料取出1~2mm高度（注意把被污染填料取凈）再把柱內(nèi)填料整平。然后用適當(dāng)溶劑濕潤的固定相（與柱內(nèi)相同）填滿色譜柱，壓平，在擰緊柱接頭。這樣處理后柱效能得到改善，但是很難恢復(fù)到新柱的水平。
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